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免疫组化之常用固定液

添加时间: 2018-09-12 作者: 爱必信 浏览次数: 837
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取材后的组织需立刻投于固定剂中,固定使组织和细胞的蛋白质凝固,终止内源性或外源性酶反应,防止组织自溶或异溶,以保持原有结构和形态;对免疫组化而言更有原位保存抗原的作用,避免抗原失活或弥散。 

常用固定剂品种很多,但大多属于醛类和醇类。其固定原理不同,各有优缺点。 

 
(1) 醛类 
*甲醛(福尔马林) 
原理:形成分子间的交联,影响蛋白构型而使之固定。 
形态结构保存好,且穿透性强,组织收缩少。但甲醛放置过久可氧化为甲酸,使溶液pH降低,影响染色; 醛基与抗原蛋白的氨基交联形成羧甲基,使抗原决定簇的三维构象出现空间障碍; 分子间交联形成的网格结构可能部分或完全掩盖某些抗原决定簇,使之不能充分暴露。可造成假阴性的染色结果。 
货号 名称 规格 货期
abs9134 Formaldehyde 25ml/500ml/1L/4L 现货

 

*戊二醛: 

穿透性强,微细结构保存好,但对抗原有一定影响,常与其他固定剂联合用作免疫电镜固定液。 


*多聚甲醛(常用4%): 

可用于免疫电镜;也可用于免疫荧光染色。主要检测组织内一些性能娇弱的抗原特别是细胞表面抗原,例如各类淋巴细胸分化决定簇(CD)、主要组织相容性抗原等。 

货号 名称 规格 货期
abs9179 4%多聚甲醛/通用型组织固定液 500ml 现货
abs9144 多聚甲醛 25g/100g/500g 现货

 

(2) 醇类 

最常用的醇类固定剂是乙醇。其固定作用是使细胞内蛋白、糖类发生沉淀。穿透性强、抗原性保存好。但脱水性强,易引起组织收缩、变硬,影响切片质量,因而乙醇固定时间不宜过长(2h内)。乙醇使蛋白变性的作用轻,固定后可再溶解;染色过程中,温育时间长,抗原可流失而减弱反应强度。 


(3) 其它固定剂 

*丙酮:对抗原性的保存好,但脱水性更强,较少 用于组织标本,但细胞爬片常用丙酮固定。 


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