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Dihydroethidium (DHE)—超氧化物阴离子荧光探针

添加时间: 2019-02-19 作者: 爱必信 浏览次数: 125
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呼~深吸一口气,你感受到了什么?
饱含O2的气流,进入肺部,通过交换进入血液,再运输至全身各处,于是一种愉悦的情绪开始从身体内部升起、蔓延……
这种深呼吸带来的安定感,除了供氧充足外,还没有给出特别合理的解释,只有斯坦福大学的一支团队给我们带来了一点启示,他们发现在小鼠脑干深处,有一群微小的神经元集群,它们将呼吸与放松、关注、兴奋和焦虑联系起来,连结着大脑的唤醒中心,可调节情绪状态。
 
这个发现也许能给呼吸与情绪的关系带来一定的启发,毕竟呼吸是那么的重要,它伴随着我们的一生,当然,任何过程都伴随着小小的隐患。
一个成年人一天大概需要0.75公斤的O2,氧分子在代谢过程中可能被单个电子还原,形成中间产物超氧阴离子O2-,其性质活泼,易与多种大分子结合使其失去活性。生物体正常代谢过程和在各种环境胁迫下均能产生超氧化物,它们的积累将引起生物体内细胞结构和功能的破坏。
人体内正常有一套活性氧清除系统,但在某些疾病的影响下,会出现氧化应激现象(即氧化与抗氧化作用失衡,倾向于氧化),超氧化物增多,所以在科研及疾病诊断中可以通过检测超氧化物的含量,来反应呼吸及疾病程度。
 
为此我们需要用到可以特异性识别超氧化物的产品——Dihydroethidium (DHE)就是我们今天的主角。
Dihydroethidium (DHE)是一种最常用的超氧化物阴离子荧光检测探针,能有效地检测活性氧类。这种染料可以自由地进入细胞,在细胞内超氧化物阴离子作用下脱氢形成溴化乙锭。溴化乙锭可以与RNA或DNA结合产生红色荧光。当细胞内的超氧化物阴离子水平较高时,产生的溴化乙锭较多,红色荧光就较强,反之则较弱。这样就可以用二氢乙锭进行超氧化物阴离子水平的检测。
 
在下面这篇文章中我们可以看到具体的DHE的应用。
 
 
这是一篇探究体外培养的CD34+细胞在缺氧和常氧状态下,抗氧化酶和谷胱甘肽氧化还原状态的变化的文章。
文章用DHE标记了超氧化物O2-,上流式进行检测。
 
结果表明,氧含量对于超氧化物和过氧化物的生成有影响,常氧状态下,过氧化物的生成比率更高,含有2mM Nac(N-乙酰半胱氨酸,谷胱甘肽的前体)时,超氧化物和过氧化物的水平接近于缺氧时的水平,所以得出结论,Nac的含量可以影响体内活性氧水平。
 
该文章的探究,正是运用了DHE对于超氧化物阴离子O2-的荧光标记作用,该探针已经广泛地用于NK细胞、中性粒细胞、内皮细胞、细胞HL60和巨噬细胞的研究,并且作为一种重要的染料用于鉴定肿瘤中细胞的增殖和低氧性。
 
爱必信生物可为您提供高品质的DHE(abs810256)用于超氧化物阴离子的标记,DHE可以溶解于DMSO,配制成适当的母液。常用浓度为0.5-5uM与细胞37℃孵育30min进行装载,之后可以上流式细胞仪或其他荧光检测仪器进行检测。
 
爱必信的DHE以高纯度和高性价比,为您的科学研究服务!
 
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