登录 |注册 |我的购物车 |用户中心 |快速购买 |批量查询 |微博 | 微信关注 |收藏本站 中文 English
购物车
您现在的位置: 首页 > 新闻中心 > 产品资讯 > 关于Ficoll,您不得不知的那些事儿
产品资讯

关于Ficoll,您不得不知的那些事儿

添加时间: 2019-02-27 作者: 爱必信 浏览次数: 338
分享到:

如果想简单、快速地分离细胞,大家第一反应肯定是密度梯度离心介质;如果您想分离人淋巴细胞,那当然少不了Ficoll啦。

Ficoll是蔗糖的多聚体,呈中性,平均分子量为400,000,当密度为1.2g/ml仍未超出正常生理性渗透压,也不穿过生物膜。红细胞、粒细胞比重大,离心后沉于管底;淋巴细胞和单核细胞的比重小于或等于分层液比重,离心后漂浮于分层液的液面上,也可有少部分细胞悬浮在分层液中。吸取分层液液面的细胞,就可从外周血中分离到单个核细胞。
PBMC(Peripheral blood mononuclear cell),外周血单个核细胞,其细胞类型为血液中具有单个核的细胞,主要包括淋巴细胞和单核细胞等,其中淋巴细胞占很大一部分。
爱必信淋巴细胞分离介质Lymphocyte Separation Medium(human, Ficoll-Paque)是一种无菌的、即用型的Ficoll-泛影酸钠密度梯度介质,能够简单快速的从少量或大量的人外周血、骨髓和脐带血中高产和高纯度的提纯淋巴细胞。本品内毒素水平非常低,小于0.12EU/mL,分离所得的细胞中95%左右为单个核细胞,细胞存活率大于90%,回收率为60%左右。

Ficoll-Paque分离人外周血PBMC的示意图:
操作protocol:

01\ 样本准备
将2mL外周血转移到15mL离心管中;
用等量的2mLPBS稀释外周血,注意吹打或颠倒混匀(如需无菌操作请在超净台内完成);
02\ 分离步骤
在离心管中加入3mL 提前混匀的Ficoll-Paque(无菌操作请用注射器);
将稀释好的血液样本缓慢加在Ficoll细胞分离液上,保证Ficoll与样本之间界面清晰(注意不要吹打或颠倒混匀);
离心300g,20℃,20min(注意要设置缓降,不能骤停);
轻轻移除上层分离液(血浆);

爱必信abs930 Ficoll-Paque分离淋巴细胞实验图
03\ 洗涤淋巴细胞
吸取“白膜层”PBMC,将其转移到新的15mL离心管中;
加3-5倍PBS充分混匀;
离心300g,20℃,10min(完全弃去上清,沉淀即PBMC细胞);
用适量PBS重悬、进行细胞计数(当细胞量>10E7时,要扩大相应试剂用量);
离心300g,10min(完全弃去上清);
备注:
(1)实验操作前,先将Ficoll-Paque和血液样本在室温放置一段时间,保持温度为18℃和20℃;
(2)分离PBMC第一步离心的时候,一定不能设置制动或设置低水平的制动,否则将分层混乱。

产品订购信息: 
   货号    产品名称    规格
   abs930    Lymphocyte Separation Medium(human, Ficoll-Paque )    50ml/100ml
   abs9102    Percoll    100ml
 

爱必信特色产品线(全部现货):
二抗、标签抗体、对照抗体;WB相关:ECL发光液、预染marker、预制胶;IHC相关:二抗试剂盒、组化笔;IP/CoIP试剂盒;细胞因子、信号通路调节剂;血清、BSA、蛋白酶K、CTB、TTX、CEE;凋亡试剂盒、呼吸爆发试剂盒;动植物提取物,定制服务(抗体/多肽/蛋白)...

 

爱必信(上海)生物科技有限公司

联系邮箱:info@absin.cn

公众平台:爱必信生物